一、儀器的主要用途和特點
XDS-440倒置顯微鏡是由倒置顯微鏡和落射熒光顯微鏡組成。倒置生物顯微鏡采用優(yōu)良的無限遠光學系統(tǒng),配置長工作距離平場物鏡與大視野目鏡,緊湊穩(wěn)定的高剛性主體,充分體現(xiàn)了顯微操作的防振要求。旋轉擺入擺出式聚光系統(tǒng),可對高培養(yǎng)皿或圓筒狀燒瓶進行無沾染培養(yǎng)細胞觀察。符合人機工程學要求的理想設計,使操作更方便舒適,空間更廣闊。產品適合于對細胞組織,透明液態(tài)組織的顯微觀察,也可對培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)組織進行動態(tài)顯微觀察??蓱糜诳蒲性核⒏叩仍盒?、醫(yī)療衛(wèi)生、檢驗檢疫、農牧乳業(yè)等部門。 XDS-440C電腦型倒置顯微鏡是將精銳的光學顯微鏡技術、先進的光電轉換技術、尖端的計算機成像技術完美地結合在一起而開發(fā)研制成功的一項高科技產品。既可人工觀察顯微圖像,又可以在計算機顯示器上很方便地適時觀察顯微圖像,并可隨時捕捉記錄觀察圖片,從而對觀察圖像進行分析,處理等,還可以保存或打印出高像素圖像照片。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
七、倒置熒光顯微鏡的原理及其應用 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
(一)熒光顯微鏡的原理和結構特點 熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內的熒光物質發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源 、激發(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。熒光光源一般采用超高壓汞燈(50一200W),它可發(fā)出各種波長的光,但每種熒光物質都有一個產生最強熒光的激發(fā)光波長 ,所以需加用激發(fā)濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發(fā)濾片),僅使一定波長的激發(fā)光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物質被激發(fā)光照射后,在極短時間內發(fā)射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激發(fā)光弱,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。它的作用有二:一是吸收和阻擋激發(fā)光進入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛,二是選擇并讓特異的熒光透過,表現(xiàn)出專一的熒光色彩。兩種濾光片必須選擇配合使用。
熒光顯微鏡就其光路來分有兩種 1.透射式熒光顯微鏡: 激發(fā)光源是通過聚光鏡穿過標本材料來激發(fā)熒光的。常用暗視野集光器,也可用普通集光器,調節(jié)反光鏡使激發(fā)光轉射和旁射到標本上.這是比較舊式的熒光顯微鏡。其優(yōu)點是低倍鏡時熒光強,而缺點是隨放大倍數增加其熒光減弱.所以對觀察較大的標本材料較好。 2.落射式熒光顯微鏡這是近代發(fā)展起來的新式熒光顯微鏡,與上不同處是激發(fā)光從物鏡向下落射到標本表面,即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。光路中需加上一個雙色束分離器,它與光鈾呈45。角,激發(fā)光被反射到物鏡中,并聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時進入物鏡,反回到雙色束分離器,使激發(fā)光和熒光分開,殘余激發(fā)光再被阻斷濾片吸收。如換用不同的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊,可滿足不同熒光反應產物的需要。此種熒光顯微鏡的優(yōu)點是視野照明均勻,成像清晰,放大倍數愈大熒光愈強。
(二)熒光顯微鏡使用方法 1.打開燈源,超高壓汞燈要預熱幾分鐘才能達到最亮點。 2.透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應的阻斷濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的插塊。 3.用低倍鏡觀察,根據不同型號熒光顯微鏡的調節(jié)裝置,調整光源中心,使其位于整個照明光斑的中央。 4.放置標本片,調焦后即可觀察。 使用中應注意:末裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標本時,必須用無熒光的特殊油鏡;高壓汞燈關閉后不能立即重新打開,需經5分鐘后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。 (三)觀察 在示教臺上的熒光顯微鏡下用藍紫光濾光片,可見經o.01%的丫啶橙熒光染料染色的細胞,細胞核和細胞質被激發(fā)產生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。 |