LONZA內(nèi)毒素檢測(cè)-LAL 試劑
鱟阿米巴樣細(xì)胞裂解物( Limulus Amebocyte Lysate,LAL )被用于檢測(cè)革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的成分脂多糖(內(nèi)毒素)。該裂解物來(lái)源于鱟(Limulus polyphemus)的循環(huán)阿米巴樣細(xì)胞。
使用 LAL 進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)來(lái)源于 Bang 的發(fā)現(xiàn), Bang 觀察發(fā)現(xiàn) Limulus polyphemus 革蘭氏陰性感染后導(dǎo)致致命性的血管內(nèi)凝聚。 Levin 和 Bang 后來(lái)發(fā)現(xiàn)這種凝結(jié)現(xiàn)象是內(nèi)毒素與鱟血中的循環(huán)阿米巴樣細(xì)胞中的一種可凝結(jié)蛋白相互作用的結(jié)果。 Levin 和 Bang 從洗滌后的阿米巴樣細(xì)胞中制備了一種裂解物,該裂解物是內(nèi)毒素的一種非常敏感的指示劑。 Solum,Young,Levin 和 Prendergast 已經(jīng)從 LAL 中純化和定性了可凝結(jié)蛋白,并且可與內(nèi)毒素發(fā)生酶促反應(yīng)。
第一個(gè)商業(yè)化 LAL 檢測(cè)分析是凝膠分析。 1977 年, FDA (生物學(xué))確定了一個(gè)裂解物的參考標(biāo)準(zhǔn)用于確定每批商業(yè)化裂解物的敏感度。他們隨后出版了詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)室操作流程用于每批裂解物和標(biāo)準(zhǔn)品的比較分析。
當(dāng)前有四種 LAL 法已經(jīng)獲得 FDA 的批準(zhǔn)。第一種,凝膠法, Cambrex 的商標(biāo)名稱為 PYROGENT,是基于內(nèi)毒素存在的條件下發(fā)生 LAL 凝結(jié)現(xiàn)象的事實(shí)。動(dòng)力學(xué)濁度法, Cambrex 商標(biāo)名稱為 PYROGENT-5000 ,是一種利用凝膠率來(lái)測(cè)定內(nèi)毒素含量的定量 LAL 法。第三種和第四種方法即顯色法, Cambrex 商標(biāo)名稱為 QCL-1000 和 Kinetic-QCL ,采用一種在有 LAL 和內(nèi)毒素的情況下能顯黃色的顯色底物來(lái)定量 LAL ,顏色的深淺與內(nèi)毒素的濃度呈線性相關(guān)。
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