支原體檢測(cè)試劑盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit)
定義:支原體(mycoplasma),又稱霉形體,沒(méi)有細(xì)胞壁的原核生物,為目前發(fā)現(xiàn)的最小的最簡(jiǎn)單的原核生物。支原體細(xì)胞中唯一可見的細(xì)胞器是核糖體(支原體是原核細(xì)胞,原核細(xì)胞的細(xì)胞器只有核糖體)。它對(duì)許多抗生素具有抗性,如類胸膜肺炎微生物。
一.支原體污染成為細(xì)胞培養(yǎng)的重大隱患:
1.研究表明,世界范圍內(nèi)超過(guò)15%的培養(yǎng)細(xì)胞都有支原體污染。
2.支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞造成多方面的影響,包括代謝、免疫或生化特性、生長(zhǎng)狀況、以及細(xì)胞存活等多方面的改變。
3.支原體污染會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性、可靠性和準(zhǔn)確性。
4.支原體難以檢測(cè),同時(shí)也很難消除。支原體能輕易地通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)濾膜,同時(shí)也能拮抗絕大多數(shù)的抗生素,給細(xì)胞培養(yǎng)造成巨大損失。
二.常規(guī)檢測(cè)才能有效避免細(xì)胞支原體污染:
1.常規(guī)性的進(jìn)行支原體檢測(cè)是保證細(xì)胞培養(yǎng)中不受到支原體污染影響的唯一途徑。
2.傳統(tǒng)的支原體檢測(cè)方法需要在特殊的選擇性培養(yǎng)基作用下對(duì)樣品進(jìn)行培養(yǎng),時(shí)間往往達(dá)數(shù)周,費(fèi)時(shí),費(fèi)力并且無(wú)法獲得足夠的靈敏度和特異性。
三. 檢測(cè)原理 |
美國(guó)Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測(cè)試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性,進(jìn)行選擇性的生物化學(xué)檢測(cè)。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作,能靈敏地檢測(cè)出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解,然后釋放出來(lái)的酶與支原體檢測(cè)試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng),將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過(guò)測(cè)量樣品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一個(gè)比率,該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在,第二次讀數(shù)相對(duì)于第一次讀數(shù)就沒(méi)有增加;如果酶與底物進(jìn)行特異性反應(yīng),就會(huì)導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過(guò)生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測(cè)到,其公式如下: Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT 這個(gè)反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C~22°C)進(jìn)行的,也是熒光素酶反應(yīng)的最佳溫度。 在支原體檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理中,最后通過(guò)分光光度計(jì)讀數(shù),由于發(fā)出光的強(qiáng)度與ATP的濃度成線性關(guān)系,因此可檢測(cè)支原體的污染問(wèn)題。 |
Lonza支原體檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)品特征 Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測(cè)試劑盒是專門檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中是否被支原體污染的經(jīng)典試劑盒,它包含檢測(cè)所用到的各種試劑和產(chǎn)品操作手冊(cè)。該支原體檢測(cè)試劑盒具有操作簡(jiǎn)單、快速高效、結(jié)果穩(wěn)定可靠、靈敏度極高等優(yōu)點(diǎn),讓您在支原體檢測(cè)時(shí)輕松容易,并確保您的培養(yǎng)潔凈無(wú)污染。該支原體檢測(cè)試劑盒的主要特征如下: 四.推薦Lonza(原Cambrex)公司 MycoAlert 支原體檢測(cè)試劑盒: 采用發(fā)光檢測(cè),更能快速反映細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。避免支原體造成的損害,省力。 1.快速--20分鐘就可以得到結(jié)果。 2.敏感度--可檢測(cè)極少量的支原體。 3.簡(jiǎn)易--僅混合2種試劑和您的樣品,將2種讀數(shù)放到照度計(jì)上就可以得到確切結(jié)果。 4.完整--試劑盒包括檢測(cè)用所需要的全部試劑! 五.訂購(gòu)信息 貨號(hào) 品名 規(guī)格 LT07-418 MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 50 tests |
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