1. 可以篩選不同蛋白-蛋白之間相互作用的強(qiáng)度；
2. 利用銅誘導(dǎo)的CUP1/ACE1系統(tǒng)能更有效的檢測體內(nèi)蛋白相互作用；
3. 利用銅抗性這種嚴(yán)格的篩選，會出現(xiàn)很少的假陽性；
4. 利用GFP這種綠色熒光蛋白的報(bào)告基因，篩選陽性菌株可以節(jié)省大量的時間；
5. 篩選陽性菌株不需要外部酶底物，如X-Gal；
6. 適合高通量的篩選分析。
產(chǎn)品介紹：
酵母雙雜交系統(tǒng)是一種用于篩選體內(nèi)蛋白-蛋白之間相互作用的方法，它依賴于DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA激活結(jié)構(gòu)域的分離，并將這兩個結(jié)構(gòu)域基因分別與兩個蛋白基因融合在一起，如果兩種蛋白能夠相互作用，就會使這兩個結(jié)構(gòu)域重組成一個有活性的轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物，這樣，就會使報(bào)告基因得以表達(dá)。
MoBiTec的ACE1雙雜交系統(tǒng)是一個強(qiáng)大的工具，它可以用于新基因的發(fā)現(xiàn)和功能分析，而且可以有效的鑒別體內(nèi)蛋白-蛋白的作用。它將銅誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子ACE1和銅抗性CUP1基因與作為報(bào)告基因綠色熒光蛋白GFP基因結(jié)合起來。兩種相互作用的蛋白分別與ACE1的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和DNA激活結(jié)構(gòu)域相融合，從而使我們可以通過下面的方法篩選：1.在含銅的培養(yǎng)基上生長的細(xì)胞；2.依賴銅表達(dá)的強(qiáng)熒光GFP可以通過紫外光檢測到。
因此，這種新技術(shù)，可以很有效的通過一步法篩選可能的陽性表達(dá)，即在含有銅的培養(yǎng)基上生長并發(fā)出綠色熒光的菌株。它是一種快速、高靈敏度和更值得信賴的檢測方法。不斷改變銅濃度還可以篩選出不同蛋白之間相互作用的強(qiáng)度。
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)：
1. 鑒定體內(nèi)蛋白-蛋白相互作用：確定一個挑選的引誘蛋白與一個由cDNA文庫表達(dá)的蛋白結(jié)合區(qū)域；
2. 陽性菌落發(fā)出綠色熒光，通過一步就可篩選出可能的陽性；
3. 不需要煩瑣的β-半乳糖苷酶檢測；
4. 通過文庫半乳糖誘導(dǎo)性表達(dá)篩選存在潛在毒性的蛋白相互作用；
5. 很少的假陽性。
產(chǎn)品介紹：
這個雙雜交系統(tǒng)提供了一個高技術(shù)和巧妙的方法來研究蛋白相互作用，另外，能表現(xiàn)出蛋白相互作用時的結(jié)構(gòu)域、氨基酸殘基和必須的條件，最終可確定新的蛋白，這種篩選能力使其成為基因發(fā)現(xiàn)和功能分析的強(qiáng)大工具。
這個系統(tǒng)簡化和加快了篩選過程，它將報(bào)告蛋白GFP和LexA蛋白結(jié)合起來構(gòu)建了酵母雙雜交系統(tǒng)。
蛋白的相互作用，導(dǎo)致了兩個報(bào)告基因（LEU2營養(yǎng)篩選基因和GFP基因）的表達(dá)，LEU2的表達(dá)，使酵母可以在缺少亮氨酸的培養(yǎng)基上生長，而GFP基因的表達(dá)，則可使酵母在紫外光下發(fā)出綠色熒光。
使用綠色熒光蛋白GFP作為報(bào)告元件避免了費(fèi)時的β-半乳糖苷酶檢測，特殊的GFP變異體由pGNG1質(zhì)粒表達(dá)的，它比野生型GFP發(fā)出的熒光要強(qiáng)18倍，兩種蛋白相互作用的酵母菌落發(fā)出的綠色熒光可以很容易的被檢測出來。
PSKAN pSKAN Phagemid Display System
PS1255 18mer-sequencing primer 1255 500 pmole
PS2897 19mer-sequencing primer 2897 500 pmole
PSKAN3 pIII antibody (monoclonal mouse IgG1) 100 μl
PSKAN2 anti-hPSTI antibody (monoclonal mouse IgG1) 100 μl
PSKAN8 pSKAN8 vector DNA, lyophilized 5 μg
PSKAN4 pMAMPF3-PSTI4 vector DNA, lyophilized 5 μg
