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二硫蘇糖醇DTT
公司名稱:湖北康寶泰精細化工有限公司
中文名稱:二硫蘇糖醇
商品名稱:DTT
CAS 編號: 3483-12-3
產(chǎn)品純度:≥97%
產(chǎn)品性狀: 白色固體
分 子 式: C4H10O2S2
分 子 量: 154.2
運輸與保存方法
冰袋運輸。產(chǎn)品+4 ?C干燥保存。
溶解性
水中最大溶解度為50mg/ml,也溶于乙醇,氯仿,乙酸乙酯。
注意事項
1)DTT粉末的穩(wěn)定性很高,但是儲存液/工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用,多余液體需丟棄。
2)此產(chǎn)品可能有毒,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名稱為二硫蘇糖醇,也稱作Cleland’s Reagent,是一種強效的還原劑,將-SH基保持在還原態(tài),常用以還原蛋白和多肽中的二硫鍵,或更普遍用以防止蛋白半胱氨酸殘基形成分子內(nèi)和分子間的二硫鍵。DTT還具有抗氧化作用,對一些隱藏的二硫鍵(溶劑無法滲透發(fā)揮作用),DTT可借助變性條件下來還原二硫鍵,如高溫或鈉離子變性劑,如6 M鹽酸胍,8 M尿素,或1% SDS。
與β-巰基乙醇相比,二者作用相似,但DTT 的刺激性和毒性都低于β-巰基乙醇,且粉末的穩(wěn)定性也高于β-巰基乙醇。DTT的最佳工作pH范圍為7.1-8.0,而在pH 6.5-9.0內(nèi)都具有活性。蛋白巰基還原實驗DTT的常用工作濃度是1-10 mM。
由于容易被空氣氧化,因此DTT的穩(wěn)定性較差;但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。由于質(zhì)子化的硫的親核性較低,隨著pH值的降低,DTT的有效還原性也隨之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP鹽酸鹽)可以作為低pH值條件下DTT的替代品,而且也比DTT更為穩(wěn)定。
作用:DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體,特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯(lián)反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反應一段時間后除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT也常常被用于蛋白質(zhì)中二硫鍵的還原,可用于阻止蛋白質(zhì)中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋于蛋白質(zhì)結(jié)構內(nèi)部(溶劑不可及)的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質(zhì)變性(高溫加熱或加入變性劑,如6M 鹽酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之,根據(jù)DTT存在情況下,二硫鍵還原速度的不同,可以判斷其包埋程度的深淺。
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