D1009L1160 蛋白酶K產(chǎn)品簡(jiǎn)介
蛋白酶K(Proteinase K),相對(duì)分子量約為29.3 kDa, 是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶??汕懈钪灏被岷头枷阕灏被岬聂然穗逆I,應(yīng)用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn),蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg /ml。因蛋白酶K在變性劑如SDS(1%)中可提高其活性,所以在使用中,常根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。蛋白酶K在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。
蛋白酶K有兩個(gè)Ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去Ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染核酸制品的蛋白質(zhì)。所以,蛋白酶k消化過程中通常也加入EDTA(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對(duì)蛋白酶k具有較強(qiáng)耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/l Ca2+而不含EDTA的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合Ca2+。
D1009L1160 蛋白酶K運(yùn)輸和儲(chǔ)存
冰袋運(yùn)輸,-20 ℃保存,可以保存12個(gè)月。避免反復(fù)凍融。
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