由于化妝品與人體的健康安全密切相關(guān),所以,按照衛(wèi)生部發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)GB7919-87(化妝品安全性評價(jià)程序和方法)<http://www.ivu.org/ivcb/gb/products/gb7919.html>的規(guī)定,所有的化妝品都必須進(jìn)行嚴(yán)格的動物測試。該標(biāo)準(zhǔn)適用于在我國生產(chǎn)和銷售的一切化妝品原料和化妝品產(chǎn)品。規(guī)定所要求的測試大部分都會導(dǎo)致動物死亡,或?qū)游锸┮院艽髠?,或?qū)е缕洳∽兊?。這方面的動物測試主要分為 5個(gè)階段共17項(xiàng)測試,其中15項(xiàng)要使用動物進(jìn)行測試,1項(xiàng)要使用動物制劑,另一項(xiàng)是人體試驗(yàn)。下面簡單加以介紹。
第一階段為急性毒性和動物皮膚、粘膜試驗(yàn),包括急性皮膚毒性試驗(yàn),急性經(jīng)口毒性試驗(yàn),皮膚刺激試驗(yàn),眼刺激試驗(yàn),皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)和皮膚光毒和光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)。
急性皮膚毒性試驗(yàn)該試驗(yàn)主要是為了確定受試物經(jīng)皮膚滲透和短期作用所產(chǎn)生的毒性。試驗(yàn)內(nèi)容主要是測試受試物涂敷動物皮膚一次性劑量后所產(chǎn)生的不良反應(yīng)。
這里涉及到通常在動物測試中經(jīng)常使用的一個(gè)概念:
半數(shù)致死量:所謂半數(shù)致死量是指一次敷用或喂食受試物引起50%受試動物死亡的劑量,稱之為半數(shù)致死量(LD50)。
該試驗(yàn)主要選用大鼠、豚鼠或家兔,并要求“將兩種性別的實(shí)驗(yàn)動物分別隨機(jī)分為5~6組,... 每組最好10只動物”。即大約要使用50只動物。試驗(yàn)規(guī)定還要求“各劑量組間要有適當(dāng)?shù)慕M距,以使各劑量組產(chǎn)生一系列的毒性反應(yīng)或死亡率”??上攵绻玫桨霐?shù)致死量的數(shù)據(jù),得毒死多少動物。
急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)該試驗(yàn)主要測試“受試物一次經(jīng)口飼予動物所引起的不良反應(yīng)”。動物選用成年小鼠或大鼠,或其它敏感動物。規(guī)定要求“一般分為5~6個(gè)劑量組。每組動物數(shù)5~10只,... 找出其粗略致死劑量范圍,然后再設(shè)計(jì)正式試驗(yàn)的劑量分組”。皮膚刺激試驗(yàn)該試驗(yàn)主要測試皮膚接觸受試物后產(chǎn)生的可逆性炎性癥狀。規(guī)定要求“每種受試物至少要用4 只健康成年動物(家兔或豚鼠)”。該試驗(yàn)分為一次性和多次性,一次性實(shí)驗(yàn)要求受試物的“敷用時(shí)間一般為24小時(shí),亦可一次敷用4 小時(shí)。多次皮膚刺激試驗(yàn)要求將受試物每天涂抹1~2次,連續(xù)涂抹14天。眼刺激試驗(yàn)該試驗(yàn)主要測試動物眼表面接觸受試物后產(chǎn)生的可逆性炎性變化。方法是將受試物“以一次劑量或多次劑量滴入(涂入)或噴灑眼內(nèi) ... 每組試驗(yàn)動物數(shù)至少4只,... 首選動物為家兔”。一次眼刺激試驗(yàn)要將“受試物滴入(涂入)實(shí)驗(yàn)動物一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi),... 記錄滴藥后6、24、48和72小時(shí)眼的局部反應(yīng),第4、7天觀察恢復(fù)情況。... 如果受試物明顯引起眼刺激反應(yīng),可再選用6只動物,將受試物滴入一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi),... 再觀察眼的刺激反應(yīng)”。多次性眼刺激試驗(yàn)則要進(jìn)行“每日一次,連續(xù)14天”的實(shí)驗(yàn)。皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)該試驗(yàn)主要測試皮膚變態(tài)反應(yīng),在人類,這種反應(yīng)可能是瘙癢、紅斑、丘疹、水皰或大皰,而動物僅見皮膚紅斑和水腫。該試驗(yàn)分為豚鼠最大值試驗(yàn)和局部封閉涂皮法。豚鼠最大值試驗(yàn)要求“實(shí)驗(yàn)首選動物為白色豚鼠,每組動物數(shù)10~25只”。試驗(yàn)過程中要先將受試物注射于動物皮內(nèi),注射后第8 天,在將受試物貼敷在注射部位,持續(xù)封閉固定48小時(shí),作為第二次致敏。然后在末次致敏后14~28天,再次貼敷受試物并“持續(xù)封閉和固定24小時(shí)。... 24、28和72小時(shí)觀察反應(yīng)”。局部封閉涂皮法“要求動物數(shù)每組10~20只”。方法是將受試物封閉固定在動物皮膚上,“持續(xù)6小時(shí)。第7天和第14天以同樣方法重復(fù)一欠。... 末次致敏后14~28天,”再重復(fù)大致相同的步驟。皮膚光毒和光變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)所謂皮膚光變態(tài)反應(yīng)是指某些化學(xué)物質(zhì)在光能參與下所產(chǎn)生的抗原抗體皮膚反應(yīng)。不通過機(jī)體免疫機(jī)制,而由光能直接加強(qiáng)化學(xué)物質(zhì)所致的原發(fā)皮膚反應(yīng),則稱為光毒反應(yīng)。試驗(yàn)要求首選動物為白色豚鼠和白色家鼠,每組動物8~10只。該試驗(yàn)有兩種方法:
皮膚光毒試驗(yàn)方法
試驗(yàn)過程要求涂藥30分鐘后,“用亞MED的中波紫外線燈照射;... 照射后1、24和48小時(shí),觀察皮膚反應(yīng)”
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