【北京總部】BTX細(xì)胞電穿孔儀售后維修電話18612256975.美國著名BTX是專業(yè)的細(xì)胞融合、電穿孔儀的生產(chǎn)廠家。ECM系列產(chǎn)品在轉(zhuǎn)基因的應(yīng)用領(lǐng)域中得以廣泛的應(yīng)用,其無以倫比的高性能得到了全球同行的厚愛。BTX的系列產(chǎn)品適用于動植物、細(xì)菌、酵母、哺乳動物、人類細(xì)胞(包括活體細(xì)胞)的轉(zhuǎn)基因等操作,操作方法可參照相關(guān)文獻(xiàn),及向廠商索要。
ECM630型是多才多藝型細(xì)胞轉(zhuǎn)基因儀,適應(yīng)于各類細(xì)胞
應(yīng)用舉例:
10-500V電壓:適用于哺乳動物細(xì)胞,植物細(xì)胞
50-2500V電壓:適用于細(xì)菌、酵母各種型號,均有多種脈沖選擇
?細(xì)菌/酵母轉(zhuǎn)化 (系統(tǒng):ECM399/630)
電穿孔現(xiàn)在被認(rèn)作是轉(zhuǎn)化細(xì)菌及酵母的zui有效的方法。革蘭氏陰性細(xì)菌(例如大腸桿菌)一般比革蘭氏陽性細(xì)菌更容易轉(zhuǎn)化,因?yàn)樗麄兊募?xì)胞壁組成不同。對于革蘭氏陰性細(xì)菌常??梢垣@得10的10次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA的轉(zhuǎn)化效率,而對于革蘭氏陽性細(xì)菌,一般可以得到10的6次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA。Chang等人(1997)成功對一個mtz-敏感的Heliobacter pylori菌株進(jìn)行電穿孔以傳遞mtz抵抗性。Planelles等人(1999)使用電穿孔轉(zhuǎn)化大腸桿菌,以避免使用包裝物質(zhì)。zui近電穿孔儀器方面的進(jìn)展將使研究人員能夠進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)菌轉(zhuǎn)化(例如脈沖長度產(chǎn)生方面擴(kuò)展的功能條件)。
RNA、DNA、蛋白質(zhì)以及小分子都已經(jīng)通過電穿孔的方法轉(zhuǎn)入酵母。沒有必要在電穿孔前部分去除酵母細(xì)胞壁,因?yàn)樵谕暾湍鸽姶┛追矫娴倪M(jìn)展可以產(chǎn)生高的轉(zhuǎn)化率。Faber等人(1994)年優(yōu)化了S.Cerevisiae的實(shí)驗(yàn)方案,使用Hansenula Polymorpha獲得了比以前的報(bào)告增加300倍的轉(zhuǎn)化效率。
在質(zhì)粒修復(fù)中,質(zhì)粒從酵母轉(zhuǎn)入大腸桿菌以進(jìn)行詳細(xì)的DNA序列分析,這是另外一種重要的技術(shù)。這種兩個步驟的過程被電穿孔進(jìn)行了簡化,用于驗(yàn)證隱性基因的結(jié)構(gòu),將其導(dǎo)入酵母,看基因性和表現(xiàn)性之間的關(guān)系。已經(jīng)建立了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方案使用指數(shù)衰減波發(fā)生器例如BTX ECM630轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實(shí)驗(yàn)方案,例如BTX ECM830,來轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。研究人員還成功將大的質(zhì)粒(BAC及YAC)導(dǎo)入細(xì)菌。電穿孔杯是細(xì)胞及酵母電穿孔的zui常用附件,而Model747共軸電極使用則變得越來越普遍。
?動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染 (系統(tǒng):ECM630/830)
對真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染可以通過多種方法獲得,例如**鈣沉淀、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、病毒方法以及電穿孔。電穿孔已經(jīng)被正式對傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法不靈的細(xì)胞有很好的效果,因此被選為zui佳的分子傳遞系統(tǒng)。電穿孔的好處有可重復(fù)性、更高的效率、大量樣本處理、無毒性以及容易使用(不需要孵育時間)。
Lofin等人(1999)對NIH/3T3細(xì)胞進(jìn)行電穿孔使mRNA進(jìn)入,以研究細(xì)胞周期及細(xì)胞分化過程中mRNA對基因表達(dá)調(diào)節(jié)、控制。Bodwell等人(1999)在對COS-7細(xì)胞進(jìn)行電穿孔是使用較長的脈沖時間后獲得了較高水平的表達(dá)。Warner等人(1997)使用電穿孔方法成功轉(zhuǎn)化了淋巴細(xì)胞。Incyte Genomics公司成功使用BTX電穿孔儀轉(zhuǎn)染了ES細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因小鼠的生產(chǎn)。BTX ECM399630830型儀器、電穿孔杯以及多種特用的電極都用于動物細(xì)胞轉(zhuǎn)染用途。
?蛋白質(zhì)電整合/電插入 (系統(tǒng):ECM630/830)
將蛋白質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞以及將蛋白質(zhì)插入至細(xì)胞膜中也可以通過電穿孔來實(shí)現(xiàn)。不光肽段,而且包括抗體的多種蛋白,也可以進(jìn)行導(dǎo)入。Ushio-Fukai等人(1998)對電穿孔插入哺乳動物細(xì)胞中的外源蛋白進(jìn)行了定量。對于這些用途可以使用多種BTX電極。
?植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化 (系統(tǒng):ECM630/830)
對植物原生質(zhì)(玉米、煙草等)及完整植物的電穿孔可以用于產(chǎn)生對農(nóng)業(yè)/園藝有用的轉(zhuǎn)基因作物。植物細(xì)胞轉(zhuǎn)化的一個主要目的是對植物細(xì)胞進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)化以產(chǎn)生具有優(yōu)良品質(zhì)及產(chǎn)量增加的作物。Lin等人(1997)優(yōu)化了多種植物上用于GUS表達(dá)的電穿孔條件,結(jié)果顯示完整植物細(xì)胞以及原生質(zhì)都可以進(jìn)行有效轉(zhuǎn)化。Diaz等人(1994)針對小麥及燕麥的葉和根的原生質(zhì)進(jìn)行了相似的優(yōu)化試驗(yàn),證明了電穿孔對于植物工作的有效性。這些作者也比較了電穿孔與PEG的差別,結(jié)果發(fā)現(xiàn)電穿孔更有效、更有重復(fù)性、更經(jīng)濟(jì)。BTX是世界上體內(nèi)轉(zhuǎn)染用特殊電極的ling先者。對于這些用途可以使用多種BTX電極,例如2針陣列、游標(biāo)尺電極 、以及Tweezertrodes。
?貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染----ACT (系統(tǒng):ECM630/830)
除了對盛在普通樣品杯的懸浮細(xì)胞進(jìn)行電穿孔外,還可以對多種培養(yǎng)板上的貼壁細(xì)胞進(jìn)行原位電穿孔。這樣可以避免用胰酶消化細(xì)胞,有助于保持細(xì)胞的活性及細(xì)胞數(shù)目。Lewis等人(1999)使用培養(yǎng)皿電極將基因轉(zhuǎn)染入人類及靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。Paptis等人(1998)通過對長在導(dǎo)電載玻片的NIH/3T3細(xì)胞進(jìn)行原位電穿孔研究信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。Teruel等人(1999)也對位于載玻片上的海馬神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)入DNA、RNA以及多種大分子。BTX為貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染(ACT)提供了PP35-2、366、747、840及Epizap電極系統(tǒng)。請關(guān)注不久后為這些用途開發(fā)的新產(chǎn)品
?高通量篩檢----HTS (系統(tǒng):ECM630/830)
高通量篩檢及cDNA文庫的建立,需要一次處理多個樣本的能力。使用傳統(tǒng)樣品杯花費(fèi)很大而且有時間限制。然而,96孔板里使用的電極對于這些類型的應(yīng)用肯定有用。Hoffma-Tsay等人(1994)使用96孔共軸電極在植物融合實(shí)驗(yàn)中檢測8種化學(xué)物質(zhì)。Peterfy等人(1995)比較了多種類型的多孔電極,將DNA傳遞入COS-7細(xì)胞。Marrero等人(1997)使用多孔電極將抗體電導(dǎo)入血管平滑肌細(xì)胞,以誘導(dǎo)細(xì)胞增值。BTX目前提供747和840用于這樣的用途,并且不斷開發(fā)新的產(chǎn)品。
?大容量生產(chǎn)(LVP)及先體外后體內(nèi)基因治療 (系統(tǒng):ECM600F)
工業(yè)用大容量生產(chǎn)或者先體外后體內(nèi)基因治療也為社會所需。人們可以先在樣品杯里優(yōu)化條件然后將實(shí)驗(yàn)方案轉(zhuǎn)成流水線作業(yè),將實(shí)驗(yàn)進(jìn)行比例放大。BTX ElectroFlowPorator系統(tǒng)有一個泵及一個改進(jìn)了的電穿孔儀組成。泵可以進(jìn)行編程并與電穿孔儀進(jìn)行同步操作,以將脈沖傳遞多批的細(xì)胞。Parham等人(1999)使用流動性系統(tǒng)優(yōu)化了CHO、COS-7、HEK293、NSO、CV-1細(xì)胞的短暫基因表達(dá),,獲得了滿意的結(jié)果。
技術(shù)規(guī)格工作狀況:
具有開機(jī)自檢功能
接口:數(shù)字式用戶接口
輸入電壓: 110V/220VAC
充電時間: zui長5秒
電壓范圍: 10-500V低壓工作模式/每次1V調(diào)進(jìn)
50-2500V高壓工作模式/每次調(diào)進(jìn)5V
電容: 1μF,25μF-3275μF低壓工作模式每次25μF調(diào)進(jìn)25μF,50μF高壓工作模式
電阻: 25-1575W調(diào)進(jìn)/每次25W調(diào)進(jìn)(高壓工作模式)
脈沖:低壓工作模式>8300RC時間常數(shù)
高壓工作模式>126RC時間常數(shù)
安全:抗短路保護(hù)zui長延遲10秒
其它指標(biāo):電流量:低壓工作模式限6000A
高壓工作模式限3000A
物理參數(shù):尺寸:12.5"×12.25" ×5.5"(W×D×H)
重量:10磅(4.5公斤)
顯示:20×4位LCD液晶顯示屏
控制器:旋轉(zhuǎn)式電壓選擇鈕按壓式電源開關(guān)及乒乓式觸發(fā)開關(guān)
監(jiān)測:能監(jiān)測電壓峰值Vp及RC充放電時間常數(shù)